X-GAL CAS:7240-90-6 98% від білого до майже білого кристалічного порошку
Каталожний номер | XD90008 |
Назва продукту | X-Gal (5-бром-4-хлор-3-індоліл-бета-D-галактопіранозид) |
CAS | 7240-90-6 |
Молекулярна формула | C14H15BrClNO6 |
Молекулярна вага | 408,63 |
Деталі зберігання | від -2 до -6 °C |
Гармонізований тарифний кодекс | 29400000 |
Специфікація продукту
Зовнішній вигляд розчину | Прозорий розчин від безбарвного до світло-жовтого (50 мг/мл у DMF:MeOH, 1:1) |
Питоме оптичне обертання | -61,5 +/- 1 |
Зовнішній вигляд | Білий або майже білий кристалічний порошок |
ВЕРХ чистоти | мін. 99% |
Розчинність (5 % у DMF) | Розчинний (5% мас./об., ДМФ) |
Водяний КФ | максимум 1% |
Аналіз (ВЕРХ на безводній основі) | мінімум 98% мас./мас |
Використання X-gal
X-gal (також скорочено BCIG для 5-бром-4-хлор-3-індоліл-β-D-галактопіранозид) є органічною сполукою, що складається з галактози, пов’язаної з заміщеним індолом.З’єднання було синтезовано Джеромом Горвіцем і його співробітниками в 1964 році. Офіційну хімічну назву часто скорочують до менш точних, але також менш громіздких фраз, таких як бромохлоріндоксил галактозид.X з індоксилу може бути джерелом X у скороченні X-gal.X-gal часто використовується в молекулярній біології для тестування на наявність ферменту, β-галактозидази, замість його звичайної мішені, β-галактозиду.Він також використовується для виявлення активності цього ферменту в гістохімії та бактеріології.X-gal є одним із багатьох індоксилглікозидів та складних ефірів, які дають нерозчинні сині сполуки, подібні до барвника індиго, в результаті ферментативно-каталізованого гідролізу.
X-gal є аналогом лактози, тому може бути гідролізований ферментом β-галактозидазою, який розщеплює β-глікозидний зв'язок у D-лактозі.X-gal при розщепленні β-галактозидазою дає галактозу та 5-бром-4-хлор-3-гідроксиіндол - 1. Останній потім спонтанно димеризується та окислюється до 5,5'-дибром-4,4'-дихлору -індиго - 2, інтенсивно синій продукт, який є нерозчинним.X-gal сам по собі безбарвний, тому наявність продукту синього кольору може використовуватися як тест на наявність активної β-галактозидази.Це також дозволяє використовувати бактеріальну β-галактозидазу (так звану lacZ) як репортер у різних застосуваннях.
У двогібридному аналізі β-галактозидазу можна використовувати як репортер для ідентифікації білків, які взаємодіють один з одним.У цьому методі бібліотеки геномів можуть перевірятися на взаємодію з білками за допомогою дріжджової або бактеріальної системи.Якщо є успішна взаємодія між перевіреними білками, це призведе до зв’язування домену активації з промотором.Якщо промотор пов’язаний з геном lacZ, продукція β-галактозидази, що призводить до утворення синьо-пігментованих колоній у присутності X-gal, таким чином, вказуватиме на успішну взаємодію між білками.Ця методика може бути обмежена скринінговими бібліотеками розміром менше приблизно 106. Успішне розщеплення X-gal також створює помітний неприємний запах через випаровування індолу.
Оскільки сам X-gal безбарвний, наявність продукту синього кольору можна використовувати як тест на наявність активної β-галактозидази.
Така проста ідентифікація активного ферменту дозволяє використовувати ген β-галактозидази (ген lacZ) як репортерний ген у різних застосуваннях.