Продукти

Активатори карбоангідрази: перше дослідження активації секреторної ізоформи VI людини з амінокислотами та амінами.

Секреторний ізофермент карбоангідрази людини (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI, був клонований, експресований і очищений у бактеріальній системі експресії.Кінетичні параметри реакції гідратації CO(2) показали, що hCA VI має ak(cat) 3,4 x 10(5)s(-1) і k(cat)/K(M) 4,9 x 10(7)M (-1)s(-1) (при pH 7,5 і 20 градусів C).hCA VI має значну каталітичну активність у фізіологічній реакції такого ж порядку, як повсюдна ізоформа CA I або трансмембранний, асоційований з пухлиною ізофермент CA IX.Було показано, що ряд амінокислот і амінів діють як активатори CA VI з різною ефективністю.l-His, l-Trp і дофамін показали слабкі активаційні ефекти CA VI (K(A)s в діапазоні 21-42 мкМ), тоді як d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, серотонін , і деякі піридил-алкіламіни були кращими активаторами, з K(A)s в діапазоні 13-19 мкМ.Найкращими активаторами CA VI були l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-аміно-l-Phe та гістамін з K(A)s у діапазоні 1,23-9,31 мкМ.Усі ці активатори посилюють k(cat), не впливаючи на K(M), беручи участь, таким чином, у швидкісному етапі каталітичного циклу, реакціях перенесення протонів між активним центром ферменту та середовищем.