Продукти

LecA (PA-IL) — це цитотоксичний лектин і адгезин, що виробляються Pseudomonas aeruginosa, який зв’язує гідрофобні галактозиди з високою специфічністю та афінністю.Використовуючи злиття трансляції lecA-egfp та імуноблот-аналіз позаклітинного матриксу біоплівки, ми показуємо, що lecA експресується в клітинах, вирощених на біоплівці.У статичних аналізах біоплівки як на полістиролі, так і на нержавіючій сталі глибина біоплівки та покриття поверхні були зменшені внаслідок мутації lecA та посилені у штамі PAO-P47, що надлишково продукує LecA.Покриття поверхні біоплівки батьківським штамом PAO-P47, але не мутантом lecA на сталевих зразках, також пригнічувалося ростом у присутності ізопропіл-бета-D-тіогалактозиду (IPTG) або п-нітрофеніл-альфа-D-галактозиду ( NPG).Крім того, зрілі біоплівки дикого типу, утворені за відсутності цих гідрофобних галактозидів, можуть бути дисперговані додаванням IPTG.Навпаки, додавання п-нітрофеніл-альфа-L-фукози (NPF), яка має високу спорідненість до лектину P. aeruginosa LecB (PA-IIL), не вплинуло на утворення або розсіювання біоплівки.Присутність IPTG, NPG або NPF не вплинула на ріст планктону P. aeruginosa PAO1, а також штам не міг використовувати ці цукри як джерела вуглецю, що свідчить про те, що спостережувані ефекти на утворення біоплівки були зумовлені конкурентним інгібуванням LecA-ліганду обов'язковий.Подібні результати також були отримані для біоплівок, вирощених в умовах динамічного потоку на сталевих зразках, що свідчить про те, що LecA сприяє архітектурі біоплівки P. aeruginosa за різних умов навколишнього середовища.

Альфа-L-фукозидаза (EC 3.2.1.51), здатна вивільняти залишок t-фукозила з бічного ланцюга олігосахаридів ксилоглюкану, була виявлена ​​в листі рослин Arabidopsis.Крім того, альфа-L-фукозидаза з подібною субстратною специфічністю була очищена з листя капусти (Brassica oleracea) для відтворення однієї смуги на SDS-PAGE.Дві пептидні послідовності були отримані з цієї білкової смуги, і вони були використані для ідентифікації гена Arabidopsis, що кодує альфа-фукозидазу, яку ми пропонуємо назвати AtFXG1.Крім того, був також знайдений ген Arabidopsis з гомологією з відомими альфа-L-фукозидазами, і ми запропонували назвати його AtFUC1.Як AtFXG1, так і ATFUC1 гетерологічно експресувалися в клітинах Pichia pastoris, а активності альфа-L-фукозидази секретувалися в культуральне середовище.Альфа-L-фукозидаза, кодована AtFXG1, була активною проти олігосахаридів з ксилоглюкану XXFG, а також проти 2'-фукозил-лактитолу, але не проти п-нітрофеніл-альфа-L-фукопіранозиду.Однак гетерологічно експресований AtFUC1 був активним лише проти 2'-фукозиллактитолу.Таким чином, перший повинен бути пов'язаний з метаболізмом ксилоглюкану.