ONPG CAS:369-07-3 98,0% мінімально білого до брудно-білого порошку
| Каталожний номер | XD90006 |
| CAS | 369-07-3 |
| Назва продукту | ONPG (2-нітрофеніл-бета-D-галактопіранозид) |
| Молекулярна формула | C12H15NO8 |
| Молекулярна вага | 301.25 |
| Деталі зберігання | від 2 до 8 °C |
| Гармонізований тарифний кодекс | 29400000 |
Специфікація продукту
| Чистота (ВЕРХ) | Хв.98,0% |
| Зовнішній вигляд | Білий або майже білий порошок |
| Рішення(1% у воді) | Прозорий, безбарвний або злегка жовтий розчин |
| Вміст води(Карл Фішер) | Макс.0,5% |
| Питоме оптичне обертання [α]D20(c=1, H2O) | від -65,0 °C до -73,0 °C |
Обговорення тесту ONPG (тест на β-галактозидазу)
Останнім часом часто виникають запитання: 1. Чому тест ONPG можна використовувати для визначення уповільненої ферментації лактози?2. Чому в національному стандарті зазначено, що для тесту ONPG необхідно використовувати 3% розчин трисахаридного натрію хлориду (або трисахаридного заліза)?3. Чому для Vibrio parahaemolyticus при проведенні ОПНГ-тесту необхідно по краплях додавати толуол за стандартом?Що таке функція?
Наша компанія переглянула багато інформації, узагальнила її та поділилася з вами нижче:
Принцип: китайська назва ONPG - о-нітробензол-β-D-галактопіранозид.ONPG може гідролізуватися на галактозу та жовтий о-нітрофенол (ONP) β-галактозидазою, тому активність β-галактозидази можна виявити за зміною кольору культурального середовища.
Лактоза - це цукор, який необхідно виявити більшості мікроорганізмів.Для його метаболізму потрібні два ферменти, один — клітинна пермеаза, лактоза потрапляє в клітини під дією пермеази;інша - β-галактозидаза, яка гідролізує лактозу в галактозу.Лактоза і глюкоза.β-галактозидаза також може безпосередньо впливати на ONPG, гідролізуючи його на галактозу та жовтий о-нітрофенол (ONP).Це можна зробити за 24 години, навіть із ферментерами із затримкою лактози.Таким чином, це пояснює результати спостереження за збиранням культури 1 з нахиленого агару та інокуляції її повним колом при 36°C протягом 1-3 годин і 24 годин.Якщо β-галактозидаза виробляється, вона жовтіє через 1-3 год, якщо такого ферменту немає, то не змінить колір через 24 год.
За цими двома ферментами мікроорганізми можна розділити на такі категорії:
1 лактозоферментуючі (18-24 години) бактерії з пермеазою і β-галактозидазою P + G +;
2 Уповільнені ферментери лактози (займають більше 24 годин) без пермеази, але містять галактозидазу: P-G+.
3 Нелактозні ферментери без пермеази та галактозидази: P- G-.
Тест ONPG можна використовувати, щоб відрізнити бактерії, що ферментують лактозу (P-G+), від бактерій, що не ферментують лактозу (PG-), наприклад:
1 Відрізнити ферментери пізньої лактози (P-G+) від ферментаторів без лактози (P-G-).
(a) Citrobacter (+) і Salmonella arizonae (+) від Salmonella (-).
(b) Escherichia coli (+) з Shigella sonnei (-).
Чому аналіз ONPG проводили з використанням нічної культури на 3% трисахариді заліза (трісахарид заліза) хлориду натрію?Наша компанія вивчила багато інформації, але чіткої заяви немає.Лише на веб-сайті FDA написано, що «Інокулюють культури для тестування на потрійний цукровий залізний агар та інкубують протягом 18 годин при 37°C (або іншу відповідну температуру, якщо потрібно). Живильний (або інший) агаровий скос, що містить 1,0 також можна використовувати % лактози».означає: досліджувані бактерії висівали на середовище трисахаридного заліза та культивували при 37°C протягом 18 годин.Також прийнятні поживні скошені агаризовані (або інші) середовища, що містять 1% лактози.Тому робиться висновок, що середовище трисахаридного заліза містить лактозу.Після нічного росту бактерії виробляли хорошу активну β-галактозидазу.Використовуючи такі бактерії, ONPG можна швидше розщепити β-галактозидазою.Експериментальне явище швидше і краще проявляється.Крім того, додають по краплях толуол і водяну баню протягом 5 хвилин, щоб повністю вивільнити β-галактозидазу.
