Продукти

1. Дослідити, чи може аденозин, отриманий з аденозиндифосфату (АДФ), пригнічувати агрегацію тромбоцитів, особливо в присутності антагоніста P2Y₁₂, де вплив АДФ на рецептор P2Y₁₂ буде запобігти. Агрегацію тромбоцитів вимірювали у відповідь на активатор рецептора тромбіну пептид шляхом підрахунку тромбоцитів у збагаченій тромбоцитами плазмі (PRP) і цільній крові в присутності АДФ і антагоністів P2Y₁₂ кангрелору, активного метаболіту прасугрелю та тикагрелору.У присутності антагоніста P2Y₁₂ попередня інкубація PRP з АДФ інгібувала агрегацію;цей ефект був скасований аденозиндезаміназою.У цільній крові не спостерігалося пригнічення агрегації, за винятком випадків, коли додавали дипіридамол для пригнічення захоплення аденозину еритроцитами.Ефекти АДФ у PRP та цільній крові були відтворені з використанням аденозину та були безпосередньо пов’язані зі змінами цАМФ (оцінено шляхом фосфорилювання фосфопротеїнів, стимульованого вазодилататорами).Усі результати були однаковими незалежно від використовуваного агоніста P2Y₁₂. АДФ пригнічує агрегацію тромбоцитів у присутності антагоніста P2Y₁₂ шляхом перетворення на аденозин.Інгібування відбувається в PRP, але не в цільній крові, за винятком випадків, коли пригнічується захоплення аденозину.Жоден із досліджених антагоністів P2Y₁₂ не відтворив ефекти дипіридамолу в проведених експериментах.

2. АДФ вважається слабким агоністом тромбоцитів через обмежену реакцію агрегації, яку він індукує in vitro при фізіологічних концентраціях позаклітинного Ca(2+) [(Ca(2+) )(o)].Зниження [Ca(2+)](o) парадоксальним чином посилює агрегацію, спричинену АДФ, ефект, який пояснюється посиленням виробництва тромбоксану А(2).Це дослідження вивчало роль ектонуклеотидаз у [Ca(2+) ](o) -залежності активації тромбоцитів.Зменшення [Ca(2+) ](o) з мілімолярних до мікромолярних рівнів перетворило викликану АДФ (10 мкмоль/л) агрегацію тромбоцитів з короткочасної на тривалу відповідь як у збагаченій тромбоцитами плазмі, так і в промитих суспензіях.Блокування продукції тромбоксану А(2) за допомогою аспірину не вплинуло на цю [Ca(2+) ](o) -залежність.Запобігання деградації АДФ скасувало відмінності між низьким і фізіологічним [Ca(2+)](o), що призвело до міцної та стійкої агрегації в обох умовах.Вимірювання позаклітинного АДФ виявило знижену деградацію як у плазмі, так і в фізіологічному розчині, що містить апіразу, при мікромолярному рівні порівняно з мілімолярним [Ca(2+)](o).Як повідомлялося раніше, утворення тромбоксану A(2) посилювалося при низьких [Ca(2+)](o), однак це не залежало від активності ектонуклеотидази. Антагоністи рецепторів P2Y кангрелор і MRS2179 продемонстрували необхідність рецепторів P2Y(12). для тривалої агрегації, викликаної ADP, з другорядною роллю P2Y(1) .Підсумовуючи, Са(2+)-залежна ектонуклеотидазна активність є основним фактором, що визначає ступінь агрегації тромбоцитів до АДФ, і її необхідно контролювати в дослідженнях активації рецептора P2Y.