Продукти

Вплив детергентів на активність атпази Р-глікопротеїну: відмінності в порушеннях базальної та верапамілзалежної активності.

P-глікопротеїн (P-gp), глікопротеїн плазматичної мембрани, пов’язаний з фенотипом множинної лікарської стійкості, відповідає за АТФ-залежний вихід різних амфіфільних препаратів.Використовуючи мембранні везикули, отримані з мультирезистентної клітинної лінії DC-3F/ADX, ми досліджували порушення базальної (тобто за відсутності лікарського засобу) і верапаміл-залежної активності P-gp-АТФази, індукованої різними детергентами, при нерозчинності, а також при солюбілізуючих, концентраціях.Поступова солюбілізація мембрани зі збільшенням концентрації детергенту контролювалася за допомогою експериментів з розсіюванням світла та центрифугуванням.Для нерозчинних концентрацій детергентів усі перевірені детергенти, крім DOC, індукували часткове інгібування активності P-gp-АТФази, яке не корелювало з кількістю різних тестованих детергентів, включених у мембрани.Аналіз індукованої верапамілом активації P-gp показує, що активність P-gp АТФ-ази по-різному модулюється різними детергентами в концентраціях, що не сприяють розчиненню.Таким чином, більш ймовірно, що відбудеться специфічна взаємодія між P-gp і детергентами, ніж глобальне порушення мембрани.Після солюбілізації різними перевіреними детергентами базальна активність P-gp-АТФази була практично повністю інгібована, за винятком присутності CHAPS, який зміг зберегти цю активність на рівні, порівнянному з виміряним у нативних мембранах.Проте індукована верапамілом активація P-gp-АТФази була втрачена під час солюбілізації P-gp за допомогою CHAPS, але відновилася після розведення CHAPS нижче його критичної міцелярної концентрації.Ці спостереження вказують на специфічні взаємодії між молекулами P-gp і CHAPS у змішаних міцелах.Загалом наші дані, що свідчать про специфічну взаємодію P-gp/детергенти, узгоджуються з розташуванням сайтів транспорту ліків на трансмембранних доменах P-gp.