Продукти

У цьому дослідженні описано простий та ефективний метод із застосуванням високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) у поєднанні з флуоресцентним детектуванням для визначення кінетичних параметрів поглинання глутамату нервовою тканиною.Тканина сітківки, отримана від 7-денних курчат, була інкубована з відомими концентраціями глутамату (50-2000 мкМ) протягом 10 хвилин, і були виміряні рівні похідного о-фтальдегіду (OPA) нейромедіатора в середовищі інкубації.Оцінюючи різницю між початковою та кінцевою концентраціями глутамату в середовищі, було охарактеризовано механізм насичуваного поглинання (K(m)=8,2 та V(max)=9,8 нмоль/мг білка/хв).Цей показник значною мірою залежав від натрію та температури, що підтверджує те, що механізм зниження концентрації дійсно полягає в поглинанні транспортерами з високою спорідненістю.Крім того, наші результати також показали, що хлорид цинку (інгібітор транспортерів глутамату/аспартату) викликає залежне від концентрації зниження поглинання глутамату, що демонструє специфічність нашої методології.Загалом, ця робота характеризує альтернативну методологію для оцінки поглинання глутамату нервовою тканиною за допомогою ВЕРХ.Цей підхід може бути важливим інструментом для досліджень, пов’язаних з характеристикою дрібних змін у транспорті глутамату, пов’язаних із пошкодженням центральної нервової системи.