Продукти

1. Методи профілювання метаболітів є важливими інструментами для вимірювання пулів метаболітів у біологічних системах.Хоча більшість методів профілювання метаболітів повідомляють про відносну інтенсивність або залежать від кількох внутрішніх стандартів, що представляють усі метаболіти, кінцевою вимогою для кількісного опису пулу метаболітів у біологічних клітинах і рідинах є визначення абсолютної концентрації.Ми повідомляємо тут про високопродуктивний і чутливий метод цільового профілю метаболітів газової хроматографії/тандемної мас-спектрометрії (ГХ/МС/МС), який дає змогу абсолютну кількісну оцінку всіх виявлених метаболітів.Метод заснований на дериватізації метилхлорформіату та кількісному визначенні шляхом додавання в зразки стандартних метаболітів, окремо дериватизованих дейтерованими реагентами дериватізації.Традиційна іонізація електронним ударом замінена позитивною хімічною іонізацією, оскільки остання значно більшою мірою зберігає молекулярний іон та інші високомолекулярні фрагменти.Це полегшило вибір унікальних переходів MS/MS серед багатьох метаболітів, що виділяються разом.В даний час новий метод ГХ/МС/МС включає 67 поширених первинних метаболітів, більшість з яких належать до груп аміно- та неаміноорганічних кислот.Ми показуємо застосовність методу на зразках сечі та сироватки.Цей метод є суттєвим удосконаленням існуючої методології для кількісного профілювання метаболітів ГХ/МС амінокислот і неаміноорганічних кислот.

2,24S-гідроксихолестерин (24OHC) і 27-гідроксихолестерол (27OHC) є двома структурно подібними оксистеролами різного походження: перший майже виключно утворюється в мозку, а другий утворюється в мозку в меншій мірі, ніж у більшості інших органів.ГІПОТЕЗА, ЯКУ ПОТРІБНО ПЕРЕВІРИТИ: пошкодження нейронів та/або демієлінізація спричиняє збільшення потоку 24OHC з мозку в спинномозкову рідину (СМР), тоді як дефект гематоенцефалічного бар’єру спричиняє збільшення потоку 27OHC із кровообігу в спинномозкову рідину. Ізотопне розведення-маса Спектрометрія була використана для аналізу двох оксистеролів у спинномозковій рідині та плазмі понад 250 пацієнтів з різними неврологічними та геріатричними захворюваннями. Рівні двох оксистеролів у спинномозковій рідині значно більше залежали від різних захворювань, ніж рівні плазми.Пацієнти з активними демієлінізуючими захворюваннями мали підвищені рівні 24OHC у спинномозковій рідині з відносно високим співвідношенням 24OHC/27OHC.Пацієнти з менінгітом загалом мали високі рівні обох стероїдів із низьким співвідношенням 24OHC/27OHC.Пацієнти з хворобою Альцгеймера мали дещо підвищений рівень 24OHC у спинномозковій рідині з меншим підвищенням 27OHC.Пацієнти з розсіяним склерозом мали тенденцію до вищих рівнів 24OHC під час активних періодів із високим співвідношенням 24OHC/27OHC. Вимірювання двох оксистеролів у спинномозковій рідині та плазмі може значно доповнити існуючі біохімічні методи оцінки неврологічних захворювань.