Продукти

Ми розробили нову систему доставки малих інтерферуючих РНК (siRNA), використовуючи потрійний комплекс з поліетиленіміном (PEI) і γ-поліглутаміновою кислотою (γ-PGA), який продемонстрував ефект глушіння та відсутність цитотоксичності.Бінарні комплекси siRNA з PEI мали розмір частинок приблизно 73-102 нм і ζ-потенціал 45-52 мВ.Ефект глушіння комплексів siRNA/PEI посилювався зі збільшенням PEI, а комплекси siRNA/PEI із коефіцієнтом заряду понад 16 показали значне руйнування люциферази в клітинній лінії карциноми товстої кишки миші, яка регулярно експресує люциферазу (клітини Colon26/Luc).Однак сильна цитотоксичність і аглютинація крові спостерігалися в комплексі siRNA/Lipofectamine і siRNA/PEI16.Повідомлялося, що перезарядка катіонних комплексів аніонною сполукою є перспективним методом подолання цієї токсичності.Тому ми підготували потрійні комплекси siRNA з PEI (коефіцієнт заряду 16) шляхом додавання γ-PGA для зниження цитотоксичності та доставки siRNA.Як і очікувалося, цитотоксичність потрійних комплексів зменшувалася зі збільшенням вмісту γ-PGA, що зменшувало ζ-потенціал комплексів.У потрійних комплексах, включаючи γ-PGA з аніонним поверхневим зарядом, було виявлено сильний ефект глушіння, який можна порівняти з комплексом siRNA/Lipofectamine.Високе включення потрійних комплексів у клітини Colon26/Luc було підтверджено за допомогою флуоресцентної мікрокопії.Досягнувши нокдауну екзогенно трансфікованого гена, здатність комплексу опосередковувати нокдаун ендогенного господарського гена, гліцеральдегід-3-фосфатдегідрогенази (GAPDH), оцінювали в клітинах B16-F10.Потрійний комплекс (комплекс siRNA/PEI16/γ-PGA12) продемонстрував значний ефект нокдауну GAPDH.Таким чином, ми розробили корисну систему доставки siRNA.