Продукти

CTP:фосфохолінцитидилілтрансфераза α (CCTα) є ядерним ферментом, який каталізує етап обмеження швидкості в CDP-холіновому шляху для синтезу фосфатидилхоліну (PC).Ліпідна активація CCTα призводить до його транслокації до ядерної оболонки та розширення внутрішньоядерної мембранної мережі, що називається нуклеоплазматичним ретикулумом (NR), за допомогою механізму, що включає деформацію мембрани.Ядерні ламіни також необхідні для стабільності та проліферації NR, але чи потрібна ця унікальна структура або ядерна ламіна загалом для синтезу ПК, невідомо.Щоб дослідити цей взаємозв’язок, ядерна пластинка була виснажена RNAi або порушена експресією мутантного ламіну A (прогерину) синдрому прогерії Хатчінсона-Гілфорда (HGPS), і було проаналізовано вплив на CCTα та метаболізм холіну.опосередковане siRNA глушіння ламіну A/C або ламіну B1 у клітинах CHO для зменшення NR не мало впливу на синтез ПК, тоді як подвійний нокдаун неспецифічно інгібував цей шлях.Підтверджуючи його незначну роль у синтезі PC, лише 10% тимчасово гіперекспресованої холін/етаноламінфосфотрансферази було виявлено в NR.У клітинах CHO CCTα був нуклеоплазматичним і локалізований спільно з GFP-прогерином у ядерних складках та інвагінаціях;однак фібробласти HGPS продемонстрували аномальний розподіл CCTα в цитоплазмі та ядерній оболонці, що супроводжувалося 2-кратним зниженням синтезу PC.Незважаючи на його змінену локалізацію, експерименти з міченням холіну показали, що на активність CCT не вплинуло, а інгібування синтезу PC було пов’язане зі зниженою активністю чутливого до геміхолінію транспортера холіну.Ми робимо висновок, що CCTα і ламіни спеціально співпрацюють для формування NR, але загальна структура ядерної оболонки має мінімальний вплив на активність CCT і синтез PC.