Продукти

Бруцели є етіологічними агентами бруцельозу, поширеного у всьому світі зоонозу.Ці бактерії є факультативними внутрішньоклітинними паразитами і, таким чином, здатні пристосовувати свій метаболізм до позаклітинного та внутрішньоклітинного середовища, що виникає під час інфекційного циклу.Однак цей аспект біології Brucella недостатньо вивчений, а поживні речовини, доступні у внутрішньоклітинній ніші, невідомі.Тут ми досліджували центральні шляхи метаболізму C, що використовуються Brucella abortus, видаляючи передбачувану фруктозо-1,6-бісфосфатазу (fbp і glpX), фосфоенолпіруваткарбоксикіназу (pckA), піруватфосфатдикіназу (ppdK) і яблучний фермент (mae) гени.У глюконеогенних, але не в насичених середовищах ріст мутантів ΔppdK і Δmae був серйозно порушений, а ріст подвійного мутанта Δfbp-ΔglpX був знижений.У макрофагах лише мутанти ΔppdK і Δmae показали знижене розмноження, а дослідження з мутантом ΔppdK підтвердили, що він досяг реплікативної ніші.Подібним чином, лише мутанти ΔppdK і Δmae були ослаблені у мишей, причому перший зникав до 10 тижня, а другий зберігався довше 12 тижнів.Ми також досліджували гліоксилатний цикл.Хоча активність промотора aceA (ізоцитратліази) посилювалася в багатому середовищі, порушення aceA не мало впливу in vitro або на розмноження в макрофагах або селезінці миші.Результати свідчать про те, що B. abortus росте внутрішньоклітинно, використовуючи обмежений запас 6-C (і 5-C) цукрів, який компенсується глутаматом і, можливо, іншими амінокислотами, що входять до циклу Кребса без критичної ролі гліоксилатного шунта.