Продукти

Серин/треонінпротеїнові фосфатази були описані у багатьох патогенних бактеріях як важливі ферменти, що беруть участь у шляхах трансдукції сигналу, залежних від фосфорилювання, і часто пов’язані з вірулентністю цих організмів.Перевірка геному Mycoplasma synoviae виявила наявність гена (prpC), що кодує передбачувану протеїн-фосфатазу підродини протеїн-фосфатази 2C (PP2C).Тут ми повідомляємо про повну біохімічну характеристику фосфатази M. synoviae (PrpC) і особливу роль іонів металів у структурно-функціональних відносинах цього ферменту.Аналіз амінокислотної послідовності PrpC показав, що всі залишки, задіяні в двоядерному металевому центрі, і передбачувані залишки третього металу, які координують іон металу, збережені в фосфатазах PP2C, присутні в PrpC.PrpC – мономерний білок, здатний дефосфорилювати фосфосубстрати залежно від іонів Mn(2+).Аналіз термічної стабільності продемонстрував стабільність ферменту при помірних температурах і вплив іонів Mn(2+) на цю властивість.Мас-спектрометричний аналіз показав, що три іони металу зв’язуються з PrpC, два з яких мають константу високої спорідненості.Мутаційний аналіз передбачуваних третіх метал-координаційних залишків, Asp122 і Arg164, показав, що ці варіанти демонструють слабше зв'язування іонів марганцю, і що обидві мутації впливають на активність PrpC фосфатази.Згідно з цими результатами, PrpC є металозалежним членом протеїнової фосфатази з покращеною стабільністю в голоформі та з Asp122, можливо, причетним до третього сайту зв’язування металу, важливого для каталітичної активності.